生物安全等級1的實際操作，安全儀器和設(shè)備設(shè)計和建立，一般在大學(xué)或中小學(xué)實驗室都可以看到。一般是用來教育和訓(xùn)練使用，或者是用在實驗操作里的微生物不會造成感染或使用者不適。此類的微生物像是Bacillus subtilus, Naegleria gruberi, infectious canine hepatitis virus,和其他被NIH Recombinant DNA Guidelines所列為的標(biāo)準(zhǔn)。很多在成人來說并不會造成傷害的病菌卻會對小孩、老年人及抵抗力不好的人等造成影響。

生物安全等級1代表實驗室擁有zui基本的包圍設(shè)施，適用在標(biāo)準(zhǔn)的微生物實驗。而且除了一個洗手臺之外，并不需要特別的主要或次要隔離。

Biosafety Level 2

生物安全等級2的實驗操作臺、安全儀器和設(shè)備設(shè)計和建立，是在臨床、診斷、教學(xué)、或其它實驗具有微量的危險性物質(zhì)和不同嚴(yán)重性的人類病毒。伴著良好的微生物操作技巧，此類物質(zhì)可以安全的在開放式桌上，當(dāng)然要盡量控制液體溢出或煙霧產(chǎn)生在zui低。Hepatitis B virus, HIV, the salmonellae, and Toxoplasma spp, 都是一些微生物在第2等級實驗室使用。第2等級也適用在人體取出的血、液體、細(xì)胞組織或是人類細(xì)胞內(nèi)含有未知的傳染性物質(zhì)。

對人員zui主要的危險性是當(dāng)人員操作接觸到黏膜，或不小心吞食感染到的物質(zhì)。還要特別留意污染到的針對或尖頭的用品。雖然說在第2等級所列的微生物中，一般來說是不會經(jīng)由空氣傳染，一些會產(chǎn)生煙霧散發(fā)到空氣或在實驗當(dāng)中可能會濺出大量的液體來對人體有害時，應(yīng)該在具有主要維護的儀器里操作，像是生物安全操作臺或安全離心機杯子。其他主要隔離應(yīng)該要適當(dāng)?shù)氖褂茫袷菗鯙R出的液體板，臉部保護，實驗室大衣和手套。次要隔離像是洗手臺和廢物消毒系統(tǒng)一定要提供來維持環(huán)境的感染到zui低。

Biosafety Level 3

生物安全等級3的實際操作，安全儀器和建立，是在臨床、診斷、教學(xué)、研究、或生產(chǎn)設(shè)備都是用在危險性物質(zhì)由呼吸道傳染而對人體造成嚴(yán)重和有可能致使的感染。

Mycobacterium tuberculosis, St. Louis encephalitis virus and Coxiella burnetii 都是被列為第3等級里操作的微生物。對人員和主要危險是在自動感染、吞食和暴露在傳染性的煙霧/氣體。

在第3等級里都是注重在主要隔離和次要隔離來保護人員、區(qū)域、和環(huán)境不被可能是危險氣體的侵害，比如說，實驗的全部操作都應(yīng)該在生物安全操作臺里或其他氣密式箱體操作。在此等級的次要隔離包括限制人員的進出和必要的通風(fēng)設(shè)備來減低傳染氣體從實驗室泄露。

Biosafety Level 4

生物安全等級4實際操作，安全儀器和設(shè)備設(shè)計和建立，是用在危險性物質(zhì)（據(jù)危害生命的），由氣體/空氣傳染而造成致使的感染，因為此傳染性病毒并沒有藥或是疫苗來治療。其他物質(zhì)與列為第4等級相同應(yīng)該也要在第4等級實驗室操作。當(dāng)足夠的資料收集到之后，再決定是否在比較低等級的實驗室里操作或是一樣在第4等到級操作。病菌像是Marburg or Congo-Crimean Hemorrhagic fever 都是要用在第4 等級的實驗室里操作。

使用者使用被列為第4等級微生物作實驗時，zui大的危險性在于呼吸到有毒的煙霧、黏膜或傷口接觸到感染的水滴，和自動感染。全部的接觸到診斷傳染性的物質(zhì)，隔離和自然或?qū)嶒炐缘母腥居卸静【膭游镆坏┞对谕?，都對人體、社區(qū)和環(huán)境造成非常大的危險。

實驗者*隔離此傳染性氣體是經(jīng)由Class Ⅲ 生物安全操作臺或是整體包裝衣服加上正壓氣體（像是太空衣）。第4等級設(shè)備通常是另一獨棟樓，或是*隔離地區(qū)具備多體、特別設(shè)計的通風(fēng)系統(tǒng)和廢料管理系統(tǒng)嚴(yán)防有活力的物質(zhì)傳播到大環(huán)境。

生物安全操作臺的概念

安全箱柜及HEPA過濾器的規(guī)格

*級

用途

操作低度危險性的微生物、病原體時，作業(yè)空間不需要清凈空氣時使用

構(gòu)造

規(guī)格

為一有抽氣裝置的操作箱，其氣流向內(nèi)流動以保護操作者，排出廢氣需經(jīng)HEPA過濾器。其平均流速為0.4公尺/秒以上，（排氣量/前面進氣口的面積。故此級操作箱可依操作方式不同分為三種：（1）正面全開。（2）正面裝有可開閉的面板，上有四個開口。（3）正面裝有可開閉的面板，上加齊臂長的橡膠手套。

第二級

用途	操作低度或中度危險性的微生物、病原體的無菌操作時，保護作業(yè)空間清凈空氣通常可分為一般生物性作業(yè)時使用的A型，及操作含有少量有害危險化學(xué)物質(zhì)、放射性物質(zhì)、氣體物質(zhì)等HEPA過濾器無法有效捕集去除的物質(zhì)的作業(yè)時使用的B型。
構(gòu)造規(guī)格	具備前面開口部及排氣口，由前面開口部流入的氣流，可防止內(nèi)部污染氣體流出，經(jīng)HEPA過濾器過濾的清潔空氣，流入作業(yè)空間，排氣時要經(jīng)過HEPA過濾器處理后排出箱體外部密閉度：箱柜內(nèi)以空氣加壓到50毫米水柱時，經(jīng)30分鐘后，內(nèi)壓下降須在10%內(nèi)。將肥皂水或的防漏檢查發(fā)泡劑涂布或噴霧，在箱柜內(nèi)所有的融接部分時，不會觀察到有因漏氣而產(chǎn)生發(fā)泡現(xiàn)象。安全性：以5~10×10⁸cfu (colony forming unit)的枯草菌作噴霧檢查時，在內(nèi)部inbin罐能夠捕集到菌落共在四個以下。實驗開始后5-15分鐘能采獲之slit sampler 的菌菌落數(shù)，每次實驗在五個以下，經(jīng)連續(xù)三次測試才算合格。試料保護試驗：以枯草菌芽胞5~10×10⁶cfu噴霧檢查時，在10公分培養(yǎng)皿之洋菜平板上所采到的菌落數(shù)為五個以下，連續(xù)三次實驗則合格。試料間相互污染的防止試驗：以枯草菌芽胞5~10×10⁴cfu噴霧檢查時，在洋菜平板中心以外離355毫米以上的位置所采集到的菌落數(shù)為二個以下，左右各三次連續(xù)測試則合格。排氣速度：在15公分內(nèi)的格子測試，各測試定點排氣的風(fēng)速在平均值的±20%之內(nèi)，在范圍內(nèi)設(shè)計一個能均勻排氣的箱柜。進氣風(fēng)速：由前門開口部流進來的風(fēng)速平均為0.4公尺以上，（B型則在0.5公尺以上）。送風(fēng)機：送風(fēng)機的濾片壓力損失在20%以上時，不做回轉(zhuǎn)控制處理，風(fēng)量減少在25%以內(nèi)。氣流方向：以目測發(fā)煙管流出來的狀態(tài)來制定，在前面開關(guān)下端100±10毫米的高度，作業(yè)空間的下層前后的吸氣流分散位置,檢查側(cè)面開關(guān)的下端150毫米的高度,前面開關(guān)20-30毫米內(nèi)側(cè)的位置，檢查側(cè)面時，煙能慢慢地向地下流動。沒有煙流下來的部分，煙不可向上逆流，以不可使煙漏出安全箱柜外。在前面開口部的外側(cè)30-40毫米位置檢查其周圍時不會使煙漏出箱柜，或不可使煙漏入作業(yè)空間。溫度上升：在4小時連續(xù)運轉(zhuǎn)后，室溫和箱柜內(nèi)的溫差相差在8℃以內(nèi)。噪音程度：噪音要保持在67分貝以下。照明度：平均照明度為800-1200lux. 震動：直角3方向作業(yè)震動雙位在5微米RMS以下。液體接收皿：液體接收皿要容易清洗，且至少可以裝4公斤的容量。
清洗與滅菌的考慮事項：	在表面上由流體的飛沫所污染時，能夠不用工具就可洗除，實驗臺及實驗空間需局部處理清除。不移動安箱柜之下，能夠用甲醛滅菌，前面的開口部、排氣口等用金屬板、塑膠板、黏膠紙可密封。為了能夠容易清掃，地板與安全箱柜zui下面的間隔要保持80毫米的空間，或地板或?qū)嶒炁_要使用密封紙封密。清除。
檢查	HEPA過濾器設(shè)置后每年施行一次檢查。

第三級

用途

高度危險性的微生物、病原體的操作

構(gòu)造

規(guī)格

密閉式的箱柜，由吸氣口流入的氣體及排氣口的排氣需用HEPA過濾器處理，排氣要用雙重的HEPA過濾器過濾，或經(jīng)燃燒滅菌裝置方可排出外面。作業(yè)空間對作業(yè)室要保持負(fù)壓（15毫米水銀柱以上），作業(yè)用的手套、試料、器具在進出時，要設(shè)有高壓菌器或滅菌液滅菌。

生物安全柜簡介

在日常生工作中，保護工作人員、樣品以及環(huán)境免受生物危害和交叉污染的需求一直非常強烈。Baker公司已開發(fā)了一系列生物安全柜以滿足生命科學(xué)、臨床、制藥以及工業(yè)實驗的各種需求。

由于上述實驗的嚴(yán)格要求，Baker產(chǎn)品的設(shè)計和制造均滿足工作的特殊需求,其性能包絡(luò)線確保具有zui寬的安全邊界和產(chǎn)品保護。

Baker鼓勵用盡可能多的了解這些特殊安全柜的能力，限制和正確使用方法，任何用來保護用戶安全的操作箱必須經(jīng)過工業(yè)衛(wèi)生專家或合格安全官的確認(rèn)。

我們歡迎用戶通過各種渠道向我們就生物安全柜的使用目的提問和提出建議。

生物安全柜設(shè)計提供不同級別的三種基本形式的防護功能：

保護操作人員免受箱內(nèi)的害物的侵害；
保護樣品免受操作、實驗和處理過程中的交叉污染；
保護環(huán)境免受箱內(nèi)污染物的侵害。

(一)、生物安全柜的分級

安全級別是在選擇生物安全柜時的一個重要因素。多年以來，各科學(xué)團普遍采用已廣為接受的分級標(biāo)準(zhǔn)。

ClassⅠ:僅保護工作人員和環(huán)境；

ClassⅠ生物安全柜僅提供對人和環(huán)境的保護。

1、ClassⅠ生物安全柜不能保護樣品免受污染，因為“不干凈”的室內(nèi)氣體不斷的從其前部流過工作臺面。

2、作為一部分密封裝置，ClassⅠ生物安全柜適用于從低到中等到生物風(fēng)險級別的樣品（生物安全級別1、2、3），這些工作需要密封，但無需保護樣品。

3、傳統(tǒng)的排煙柜不同，ClassⅠ的HEPA通過過濾排出氣體達到保護環(huán)境的目的；

4、對工作人員的保護是通過不斷的將氣體吸入箱內(nèi)來實現(xiàn)的。

分類	生物安全級別	應(yīng)用
ClassⅠ	1、2、3	低等生物風(fēng)險樣品
ClassⅡ	1、2、3	低等生物風(fēng)險樣品
ClassⅢ	4	高等生物風(fēng)險樣品

生物安全柜分為三個級別，Baker的標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品包括ClassⅠ和ClassⅡ，Baker同時也能開發(fā)和生產(chǎn)全密封的ClassⅢ生物安全柜。

（二）ClassⅡ的不同型號

舊工業(yè)分類	現(xiàn)在NSF分類	一般描述
ClassⅡ，Type A	ClassⅡ,Type A	70%氣體循環(huán)，30%氣體通過風(fēng)道排到室內(nèi)
ClassⅡ，Type B	ClassⅡ,Type B1	30%氣體循環(huán)，70%氣體通過風(fēng)道排到排風(fēng)管道
ClassⅡ，100%排出	ClassⅡ,Type B2	無氣體循環(huán)，100%氣體通過風(fēng)道排到排風(fēng)管道
N/A	ClassⅡ,Type B3	70%氣體循環(huán)，30%氣體通過風(fēng)道排到排風(fēng)管道

ClassⅡ生物安全柜：樣品、人員、環(huán)境保護。

ClassⅡ生物安全柜必須滿足保護樣品、人員、環(huán)境的需求，這一級生物安全柜廣泛應(yīng)用于臨床、醫(yī)院、生命科學(xué)和制藥業(yè)實驗室。Baker公司是世界的ClassⅡ生物安全柜制造商，共有5個系列的ClassⅡ生物安全柜：

·SterilGARD

·BioGARD

·NCB-C

·BiochemGARD

·SterilchemGARD

一般來說，ClassⅡ生物安全柜具有三個關(guān)鍵的特征：

·前部工作開口可以維持合適的箱內(nèi)氣流

·箱體內(nèi)有經(jīng)過HEPA過濾垂直向下無指向的氣流

·排出的氣流經(jīng)過HEPA過濾，排到室內(nèi)或管道

垂直向下的間接氣流和前部工作開口是大多數(shù)ClassⅡ生物安全柜的共同特征，但是由于ClassⅡ生物安全柜允許的不同的氣流方式、風(fēng)速、HEPA過濾器位置、排風(fēng)速度和模式，因此用一后綴來區(qū)分不同ClassⅡ生物安全柜，NSF已重新調(diào)整了ClassⅡ生物安全柜的分類系統(tǒng)以反應(yīng)設(shè)計上的修改，了解不同型號ClassⅡ生物安全柜的區(qū)別對于正確選擇很重要。一般來說，生物安全柜是根據(jù)循環(huán)使用或排出空氣容積來分類。

NSF對生物安全柜進行各種測試以確保產(chǎn)品滿足NSF對生物安全柜分類的zui低標(biāo)準(zhǔn)。

·NSF標(biāo)準(zhǔn)每五年修改一次

·生產(chǎn)商對生物安全柜的測試結(jié)果需遞交給NSF

·滿足這些標(biāo)準(zhǔn)的產(chǎn)品才能得到NSF的認(rèn)證

·生物安全柜的測試每五年進行一次

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